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双荧光素酶检测【启动子活性分析】
双荧光素酶检测【miRNA对靶基因调控研究】
 
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microRNA研究攻略

   MicroRNA (miRNA) 是一类由内源基因编码的长度约为22 个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。microRNA的表达、抑制或过表达对于研究基因功能有重要的意义。目前信诺金达对于microRNA研究相关的服务如下:

1. microRNA qPCR定量检测

检测microRNA的差异表达,各种无传染性致病性样品均可提供(如果是这里样品,请提供总RNA或小RNA)。提供登录号(http://www.mirbase.org/ )或microRNA序列。我们出具详细实验报告,茎环法或加尾法反转录均可选择,服务的连接如下:

miRNA荧光定量PCR

2. microRNA载体构建

动物或植物microRNA的过表达载体或抑制表达载体均可构建。过表达载体可以表达pre-miRNA或atmiRNA;抑制表达可以合成miRNA inhibitor或构建STTM的抑制表达载体,详细介绍,请点击下面链接:

植物miRNA过表达/抑制表达载体构建

动物miRNA载体构建

3. microRNA靶位点结合预测及双荧光素酶载体构建,荧光素酶检测

miRNA通过碱基互补配对的方式识别靶基因的3’UTR区,并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。根据软件或数据库预测靶位点及构建靶位点的荧光素酶载体并检测。详细介绍,请点击下面链接:

双荧光素酶报告基因检测【miRNA对靶基因调控研究】

4. microRNA转染细胞后,靶基因的表达检测

细胞培养,mimics或inhibitors转染,或表达,抑制载体转染,检测下游基因的mRNA表达或蛋白水平的表达,或蛋白之间的互作:

细胞培养、模型建立、功能分析技术服务

荧光定量PCR(qPCR)实验技术服务

Western Blot

IP 和Co-IP

参考文献

1.Kluiver J, Gibcus JH, Hettinga C, Adema A, Richter MKS, et al. (2012) Rapid Generation of MicroRNA Sponges for MicroRNA Inhibition. PLoS ONE 7(1): e29275. doi:10.1371/journal.pone.0029275

2.Tang G, Yan J, Gu Y, Qiao M, Fan R, Mao Y, Tang X. (2012) Construction of short tandem target mimic (STTM) to block the functions of plant and animal microRNAs. Methods 58(2):118-25.

更多服务详情,或实验设计等整体服务,敬请发送到info@sinogenesci.com或电话咨询信诺金达技术部,咨询电话:010-56545250 技术支持QQ: 78001304

 

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